抗原參數(shù)

標(biāo)記抗體及抗體偶聯(lián)磁珠

發(fā)光大包裝試劑

• 化學(xué)發(fā)光平臺(tái)（AE）

1.羅氏樣本符合率

用tPSA抗體（R183a3、R263e3）檢測(cè)76例羅氏賦值樣本（濃度范圍0.002-83.25ng/mL），樣本符合率（R²）為0.9878。

編號(hào)	樣本濃度 （ng/mL）	檢測(cè)濃度 （ng/mL）
1	0.002	0.004
2	0.002	0.004
3	0.013	0.015
?	?	?
75	72.44	77.33
76	83.25	75.26

表1. tPSA臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)（羅氏賦值）

圖1. tPSA臨床對(duì)比分析（羅氏賦值）

2.最低檢測(cè)限

用PSA大包裝試劑（tPSA02）對(duì)零濃度稀釋液重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算最低檢測(cè)限。

名稱	濃度（ng/mL）	RLU平均值	線性方程
校準(zhǔn)品S1	0	2080	y=48645x+2080
校準(zhǔn)品S2	0.983	49898
20次重復(fù)測(cè)定零濃度稀釋液RLU值
2136	1986	2022	2239
2075	2102	2053	2561
2236	2236	2566	2001
2365	2136	2438	2032
2158	2044	2104	2119
RLU均值		2180
SD		175.7
平均值+2SD		2532
最低檢測(cè)限（ng/mL）		0.009

表2. tPSA發(fā)光大包裝試劑最低檢測(cè)限

3.線性

將濃度為111.2ng/mL的羅氏賦值高濃度樣本，用樣本稀釋液稀釋為60%、30%、15%、5%、0.5%和0.05%六個(gè)濃度。用tPSA02對(duì)高濃度樣本及六個(gè)稀釋樣本進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算相關(guān)性。

百分比	濃度（ng/mL）	RLU	絕對(duì)偏差	相對(duì)偏差
100%	111.2	4960266	/	0.50%
60%	65.41	3002304	/	-1.30%
30%	32.8	1562294	/	-0.60%
15%	16.42	777590	/	0.20%
5%	5.33	251886	0.04	/
0.5%	0.49	26133	0.19	/
0.05%	0.05	4351	0.24	/
相關(guān)性：0.99994

表3.tPSA發(fā)光大包裝試劑線性

4.重復(fù)性

利用同一批tPSA02對(duì)濃度為4.02ng/mL和31.03ng/mL的羅氏賦值樣本各重復(fù)檢測(cè)10次，其測(cè)量濃度變異系數(shù)（CV）均小于2%。

低值樣本
編號(hào)	RLU	濃度（ng/mL）
1	191699	4.01
2	196736	4.12
3	193531	4.05
4	190783	3.99
5	194905	4.08
6	192615	4.03
7	193531	4.05
8	192615	4.03
9	192157	4.02
10	190783	3.99
平均值	/	4.037
標(biāo)準(zhǔn)差	/	0.040
CV	1.0%

表4. tPSA發(fā)光大包裝試劑重復(fù)性（低值）

高值樣本
編號(hào)	RLU	濃度（ng/mL）
1	1481944	31.06
2	1458276	30.55
3	1481944	31.06
4	1480090	31.02
5	1488432	31.20
6	1476844	30.95
7	1489359	31.22
8	1525889	32.01
9	1456882	30.52
10	1433155	30.01
平均值	/	30.96
標(biāo)準(zhǔn)差	/	0.529
CV	1.71%

表5. tPSA發(fā)光大包裝試劑重復(fù)性（高值）

前列腺特異性抗原（Prostate-specific antigen，PSA）也稱作γ精液蛋白（γ-seminoprotein）、激肽釋放酶-3（Kallikrein-3，KLK3），分子量約為33-35kDa，是一種具有絲氨酸蛋白酶和糜蛋白酶樣活性的單鏈糖蛋白，屬于肽酶S1家族， 激肽釋放酶亞科。

PSA主要由前列腺柱狀上皮細(xì)胞合成，存在于精液、前列腺液、血液及尿液中。受前列腺導(dǎo)管系統(tǒng)周圍環(huán)境的屏障作用，PSA在外周血中含量很低，其中5-40%的PSA以酶原或無(wú)活性PSA分解物的游離形式（fPSA）存在。剩余60-90%的PSA可與α1-抗糜蛋白酶（ACT）、α2-巨球蛋白（A2M）、α1-蛋白酶抑制劑（API）等內(nèi)源性蛋白酶抑制物形成復(fù)合物，其中具有免疫活性的PSA-ACT最多。fPSA可經(jīng)腎臟過(guò)濾清除，半衰期一般為1.5小時(shí)。大分子的PSA復(fù)合物不能經(jīng)腎臟清除，半衰期較長(zhǎng)，一般為2-3天。

前列腺特異性抗原（PSA）的生物學(xué)功能

PSA參與精液凝塊的液化和射精后精子活力的激活。在前列腺組織中，PSA活性受鋅離子的抑制，當(dāng)精液中鋅離子濃度降低，活性抑制解除。PSA通過(guò)分解精液中的精膠蛋白和纖維粘合素，使精液排出后液化，促進(jìn)精子活動(dòng)。通過(guò)釋放激肽樣物質(zhì)，誘導(dǎo)平滑肌收縮，促進(jìn)受精過(guò)程中精子前沖上移。

另外PSA具有刺激細(xì)胞分裂，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制免疫細(xì)胞增殖，溶解基低膜等功能。 PSA能水解胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白（IGFBPs），釋放有活性的游離胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF-I），促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、腫瘤惡化。PSA通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)中的層連蛋白、纖連蛋白，溶解基底膜，促進(jìn)細(xì)胞脫落、腫瘤轉(zhuǎn)移。

前列腺特異性抗原（PSA）的臨床應(yīng)用

PSA是目前早期臨床篩查前列腺癌的敏感指標(biāo)，在前列腺癌的診斷、分期、治療后檢測(cè)和評(píng)估等方面具有重要的指導(dǎo)意義。PSA具有前列腺組織特異性，無(wú)腫瘤特異性；且無(wú)法用于區(qū)分前列腺良、惡性疾病。臨床診斷前列腺癌可結(jié)合%fPSA、PSA密度（PSAD）、PSA速率（PSAV）等指標(biāo)，提高PSA灰區(qū)的敏感性和特異性。

前列腺癌診斷PSA參考區(qū)間及臨床分期

A. 參考區(qū)間

1. 血清PSA檢測(cè)的參考區(qū)間為＜4.0μg/L。
2. 血清PSA濃度4.0~10.0μg/L為灰區(qū)，需直腸指檢（DRE）輔助診斷。若DRE陽(yáng)性；或DRE陰性， %fPSA＜10%，應(yīng)進(jìn)一步做前列腺穿刺活檢。
3. 血清PSA濃度＞10μg/L，結(jié)合前列腺穿刺活檢結(jié)果明確診斷。

B. 臨床分期

表1 前列腺癌臨床分期指標(biāo)

注：數(shù)據(jù)來(lái)源于《WS/T460—2015前列腺特異性抗原檢測(cè)前列腺癌臨床應(yīng)用》； Gleason為病理分級(jí)。